上期推送，我们给大家介绍了CD161和LLT1，并且讲述了CD161在NK细胞上的调控模式以及肿瘤微环境的巨大挑战。本期，我们会接着带来CD161成药性的挑战以及CD161在T细胞尤其是CD8+的T细胞的病理机制。 一、成药性的挑战 考虑到以上困难，如果有CD161的研发管线，就非常值得借鉴，然而（图9）： 图9 没有公开信息表明，以CD161和LLT1为靶点的抗体，含有国际非专用名，并进入临床研究了。 
图10 没有查到CD161抗体相关专利。但是其作为肿瘤治疗靶点，已有若干申请，本图举例说明。 目前，CD161更多的是作为免疫细胞亚群的标记信号，以表征细胞亚群在不同疾病治疗中的变化。 CD161/LLT1可能存在成药的困难。分析原因，可能有： 1. 阻断结果的矛盾：阻断对于NK细胞，可以释放其免疫活性。然而对于T细胞，结果则相反，通过LLT1的阻断实验发现，在CD4+ CD8+的T细胞中，激活后的T细胞高表达CD161。不过，CD161也可能作为负反馈信号，却缺少LLT1的结合，从而不能实现抑制。这需要调研相关病理情况。 2. CD161和LLT1的结合能力较弱：KD约48μM，二元复合体的稳定性不强，阻断活性不易判断。参考NKG2A/CD94与HLA组成三元复合体，该三元复合体的结构可能更稳定，以进行拮抗活性抗体的筛选，是值得参考的。 3. 结合表位：LLT1在体内受CLEC2D其他变体的干扰，表位难以选定。但是根据文献报道，目前已存在的LLT1抗体，可以实现阻断LLT1与CD161结合。 而CD161的结合表位，与N糖修饰关联可能性较大。如果存在靶向的抗体，N糖修饰的个体差异，可能导致抗体脱靶。另外，RSCB-PDB数据库中已有两者的结构数据，有助于我们预测复合体结合情况，比如https://www.rcsb.org/structure/5MGT（图11A），https://www.rcsb.org/structure/5MGR（图11B）。可以看到N糖修饰在蛋白表位的位置。 A. LLT1胞外域 B. CD161胞外域 图11 LLT1和CD161胞外域的晶体结构。使用该数据，我们可以模拟两个分子的结合。
二、T细胞：向左，自身免疫；向右，肿瘤 CD161在T细胞，尤其是CD8+的T细胞的病理机制，也具有巨大的潜力。 有研究发现，北欧的多发性硬化症（MS），与CD161在CD8+CD3+ T细胞中的异常过表达有关，血液中的CD161显著高于健康人群（图10）。CD161highCD8+CD3+ T细胞，伴随高表达的IL-17，IL-12介导增殖，释放IFN-γ。这些IFN-γ可能导致了MS患者大脑中的免疫损伤，以及异常的B细胞囊泡。 之前提到，CD161的表达与IL-17的分泌有很强的相关性。IL-17作为信息沟通的桥梁，在T细胞调节的获得性免疫，以及针对细胞外的细菌、真菌的急性炎症响应，起到重要的作用。IL-17是CD3γδ+的T细胞，或者Th17，或者NKT，产生的效应细胞因子，可激活中性粒细胞，并将其招募到感染和炎症的部位。IL-17也是调节B细胞效应的细胞因子，在抗病毒方面有积极作用。 通常，我们认为MS与类风湿性关节炎（RA）类似，是一种自身免疫疾病。然而，CD161在其中的表现不同。MS患者中，CD161在CD8+的细胞毒性体细胞中，显著高表达，而RA患者中，CD161在CD8+的细胞毒性体细胞中，显著低表达（图11）。 类似的，在克郎氏症中，也是CD4+的T细胞中，异常高表达CD39和CD161。 图12 CD161在MS患者中的异常高表达，可被IFN-β治疗到低于正常水平。 
图13 MS和RA中，CD8+或CD4+的T细胞上，CD161的阳性率近似（A、C）。然而，在CD8+的T细胞，通常认为是细胞毒性T细胞上，MS中CD161的表达显著更高（B），CD4+的T细胞差异不大（D）。 对肝癌组织及患者的血液样本的研究，发现对CD8+PD1+的T细胞（具有细胞毒性），CD161+和CD161-的呈现了分布上的显著差异，而这种差异可能与不同的演化线路有关。CD161+的T细胞，在肿瘤组织的比例低于正常组织，但是CD161-的T细胞降低的比例更高。CD161+的T细胞，具有更强的细胞毒性、增殖能力、肿瘤组织浸润性（图14）。 这也预示着，激活CD161信号通路，而不是阻断，可能更有利于抗肿瘤的治疗。LLT1对CD161亲和力不足，需要亲和力更高的多肽、抗体。而激活型多肽、抗体的获得，往往难于阻断性抗体。 
图14 CD161+的T细胞，不同于CD161-的T细胞，不依赖于LAG3-MHCII，具有更强的细胞毒性，增殖能力，以及浸润肿瘤组织的能力。 
图15 CD8+CD161+在感染（A）、肿瘤治疗（B）、自身免疫（C）相关的机制。
三、结尾 CD161作为NK细胞的靶点，阻断其与LLT1的结合，可以提高NK的细胞毒性。同时，CD161对细胞毒性T细胞的活性、记忆分化有正面作用，阻断CD161反而减弱了免疫活性，不过，这种阻断，在治疗自身免疫疾病时，可以起到非常好的效果。因此，选择CD161/LLT1阻断型抗体的适应症，需要考虑其免疫系统的细胞亚群的活性，是否适用于阻断机制。 然而，根据clinictrial的搜索结果，CD161更多的是作为临床实验中，细胞亚群表征的标志物，与CD25、CD69、CD56的应用比较接近。
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